Тіогліколеве середовище
Тіогліколеве середовище - це середовище, яке використовують для контролю стерильності різних біоматеріалів, а також для культивування широкого кола аеробних, мікроаерофільних і анаеробних бактерій.
Склад
ред.Гідролізат казеїну - 15,00 грам/літр
Дріжджовий екстракт - 5,00 грам/літр
Глюкоза - 5,50 грам/літр
Натрію хлорид - 2,50 грам/літр
L-цистин - 0,50 грам/літр
Натрію тіогліколят - 0,50 грам/літр
Резазурін - 0,001 грам/літр
Агар-агар - 0,75 грам/літр
Кінцеве значення рН (при 25°З) 7,1 ± 0,2
Приготування
ред.Розмішати 29,75 г порошку М009 або в 1000 мл дистильованої води. Прокип'ятити для повного розчинення частинок. Стерилізувати автоклавуванням при 1,1 атм (121°С) протягом 15 хв. Охолодити до 25°С і залишити для зберігання в темному прохолодному місці (при температурі нижче за 25°С).
Примітка : якщо більш, ніж третина середовища зверху стала рожевого кольору, її можна один раз відновити, прогрівши у киплячій водяній бані або струмені пари до зникнення рожевого забарвлення.
Принцип і оцінка результату
ред.Це середовище запропонував Бревер [1] для швидкого культивування аеробів, а також анаеробів (в зв'язку з додаванням редукуючої речовини і невеликої кількості агар-агару). Американські фахівці [2][3] рекомендували вказані середовища для тестів на стерильність антибіотиків, біоматеріалів, харчових продуктів, а також для визначення фенолового коефіцієнту і спороцидних властивостей дезінфектантів. Разом з тим, середовища призначені для дослідження прозорих рідин і водорозчинних матеріалів. Глюкоза, гідролізат казеїну, дріжджовий екстракт, м'ясний екстракт і L-цистин дають поживні речовини для розмноження бактерій. Тіогліколят натрію знижує окислювально-відновлювальний потенціал, а також нейтралізує бактеріостатичний ефект з'єднань ртуті і інших важких металів, що знаходяться в досліджуваному матеріалі. Будь-яке підвищення концентрації кисню супроводиться зміною кольору спеціального індикатора редокс-потенціалу резазуріна на червоний [4][5][6]. Низький редокс-потенціал допомагає підтримувати невелика кількість агару в середовищі[7].
Контроль якості
ред.Зовнішній вигляд порошку
ред.Гомогенний сипучий жовтий порошок.
Колір і прозорість готового середовища
ред.Готове середовище має світло-солом'яне забарвлення, прозоре або злегка опалесціює; не більше за 10% в його верхній частині може забарвлюватися в рожевий колір при зберіганні.
Кислотність середовища
ред.При 25°С водний розчин М009 (2,97% вага/об‘єм) має рН 7,1 ± 0,2.
Культуральні властивості
ред.Ростові характеристики референс-штамів через 48-72 год при 35°С.
Штам мікроорганізмів (АТСС) Ріст
- Bacillus subtilis (6633) - Рясний
- Candida albicans (10231) - Рясний
- Clostridium sporogenes (11437) - Рясний
- Micrococcus luteus (9341) - Рясний
Neisseria meningitidis (13090) - Рясний
Streptococcus pyogenes (19615) - Рясний
- Bacteroides vulgatus (8482) - Середній або хороший
Примітка: * культуру можна інкубувати при 25-30°С протягом 2-7 днів.
Умови і терміни зберігання
ред.Порошок зберігати при температурі нижче за 25°С. Вжити до дати, вказаної на етикетці. Готове середовище зберігати при кімнатній температурі в темряві.
Посилання
ред.- ↑ Brewer, 1940, J. Am. Med. Assoc., 115:598.
- ↑ U. S. Pharmacopeia, 2002, USP 25/NF 20, Asian Edition, United States Pharmacopeial Convention, Inc., Rockville, MD.
- ↑ Cunniff P. (Ed.), 1995, Official Methods of Analysis of the Association of Official Analytical Chemists, 16th ed., AOAC, Washington, D.C.
- ↑ Marshall, Gunnison and Luxen, 1940, Proc. Soc. Exp. Biol. Med., 43:672.
- ↑ Nungester, Hood and Warren, 1943, Proc. Soc. Exp. Biol. Med., 52:287.
- ↑ Portwood, 1944, J. Bact., 48:255.
- ↑ MacFaddin J.F., 1985, Media for Isolation-Cultivation-Identification-Maintenance of Medical Bacteria, Vol. 1, Williams and Wilkins, Baltimore.