Трансформація (генетика): відмінності між версіями

* Протокол замерзлих дріжджів (''Frozen Yeast Protocol'') дозволяє приготування замерзлізамерзлих клітин дріжджів, компетентних для трансформації після розморожування.

* Трансформація за допомогою ''[[Agrobacterium tumifaciens]]''. ''Agrobacterium tumifaciens'' — це природняприродна бактерія, яка паразитує на рослинах і містить спеціальну Ti — [[Плазміда|плазміду]], в склад якої входить Т-ДНК, що здатна проникати в клітину рослини господаря і вбудовуватись в геном, а також vir-гени, відповідальні за процес переносу ДНК. Т-ДНК містить гени синтезу рідкісних амінокислот і вуглеводів (опінів), якими живиться бактерія, а також гени фітогормонів, що спричиняють пухлиноподібний ріст рослинних тканин. Рецептори на поверхні бактерії сприймають продукти розпаду рослинної клітинної стінки, в результаті чого активуються vir-гени, продукти яких сприяють процесу переносу Т-ДНК в рослинну клітину. Сама бактерія в рослинну клітину при цьому не потрапляє. Для генетичної трансформації рослинної клітини використовують бінарну веторну систему, яка складається з '''[[Плазміда|плазміди]], що містить Т-ДНК''', де гени синтезу опінів і пухлиноутворюючих фітогормонів замінені на цільовий ген, який має вбудуватись і '''хелперної плазміди''', що містить vir-гени, що обслуговують процес переносу ДНК. <ref>Schell J, Van Montagu M., The Ti-plasmid of Agrobacterium tumefaciens, a natural vector for the introduction of nif genes in plants?, Basic Life Sci. 1977;9:159-79</ref><ref>Joos H, Timmerman B, Van Montagu M, Schell J, Genetic analysis of transfer and stabilization of Agrobacterium DNA in plant cells, EMBO J. 1983; 2(12): 2151–2160</ref>. Рослинна тканина (найчастіше, листя) нарізається на маленькі шматки, (близько 10x10 мм) і поміщається на 10 хвилин в середовище з ''Agrobacterium'', який містить [[Плазміда|плазміду]] для перенесення. Здатність рослин утворювати на місці поранення [[Меристема|меристематичну]] тканину, яка при певних умовах (фітогормональному складі середовища ''in vitro'') здатна до [[Регенерація (біологія)|регенерації]] і утворює [[Вегетативні органи|вегетативні пагони]] з окремих трансформованих клітин. Далі рослини вирощуються на селективному середовищі.