Молекулярне клонування: відмінності між версіями
| [неперевірена версія] | [неперевірена версія] |
Вилучено вміст Додано вміст
Рядок 150:
=== Скринінг ===
Оскільки після трансформації утворюються клони, що містять різні продукти лігування, виникає потреба у пошуку і відборі лише тих клонів, що містять досліджувану послідовність. Існує дві загальні стратегії відбору потрібних клонів:<ref>{{cite book|author = T.A. Brown | title = Gene cloning and DNA analysis: an introduction.| location= Manchester| publisher = Wiley-Blackwell,| year = 2010| page=127}}</ref> 1) пряма селекція; 2) пошук з [[бібліотека(біологія)|бібліотек клонів]].
При прямій селекції трансформанти висівають на селективне середовище, що містить маркер, який дозволяє рости лише бажаним колоніям. В найпростішому випадку таким маркером є стійкість до антибіотику, який може, наприклад, знаходитись у векторній послідовності. Однак навіть в такому випадку існує можливість трансформації клітин порожньою плазмідою, що не лігувалась зі вставкою. Для точнішого скринінгу використовують додаткові техніки, наприклад використання на агарозному середовищі кольорових маркерів, таких як [[X-Gal]] та [[IPTG]].
| |||