Молекулярне клонування: відмінності між версіями
| [неперевірена версія] | [неперевірена версія] |
Вилучено вміст Додано вміст
Рядок 48:
Часто для дослідження еукаріотичних генів береться не геномна ДНК, а інформаційна РНК, на матриці якої за допомогою [[ПЛР зі зворотньою транскрипцією]] утворюється [[комплементарна ДНК]] (кДНК), тобто послідовність еукаріотичного гену, в якому відсутні інтрони. Це дозволяє зменшити довжину клонованої послідовності без зміни при подальшій експресії у первинній структурі білка.
Процедура виділення тотальної РНК загалом подібна до виділення ДНК, однак має певні особливості.<ref name="M. S. Box 2011">{{cite journal
Виділення РНК має певні особливості. Так, якщо ДНК представлена в клітинах в рівній мірі, то наявність і рівень експресії конкретної РНК, як правило, варіює в різних органах і тканинах. Другою особливостю є малий час існування мРНК: бактеріальна мРНК дуже нестабільна, період напіврозпаду - кілька хвилин; період напіврозпаду еукаріотичної мРНК вимірюється годинами і добами.<ref name="ОВЧИННИКОВ 2009">{{cite journal▼
|author= M. S. Box
|coauthors=M. S. Box, V. Coustham,3, C. Dean, J. S. Mylne1
|year=2011
|title=Protocol: A simple phenol-based method for 96-well extraction of high quality RNA from Arabidopsis
|url=http://www.plantmethods.com/content/7/1/7
|journal=Plant Methods
|issue=7
|volume=7
|pages=
|doi:=10.1186/1746-4811-7-7
▲
|author= Л. П. ОВЧИННИКОВ
|coauthors=
| |||