Молекулярне клонування: відмінності між версіями

[неперевірена версія][неперевірена версія]
Вилучено вміст Додано вміст
Makkreker (обговорення | внесок)
Makkreker (обговорення | внесок)
Рядок 36:
По-друге, необхідно обрати вектор для клонування. Векторна молекула повинна відповідати декільком обов'язковим умовам: 1) вектор повинен тривалий час існувати в популяції клітин-господарів (тобто реплікуватись або автонономно, або разом з хромосомами клітин); 2) має містити біохімічні або генетичні маркери, які дозволяли виявляти його у клітинах; 3) структура молекули повинна допускати вбудування в неї нуклеотидної послідовності без порушення її функціональної цілісності.<ref>{{cite book|author = Патрушев Л.И. | title = Экспрессия генов.| location= Москва | publisher = Наука,| year = 2000| page=558 }}</ref> Для конструювання векторів використовують плазміди, вірусні хромосоми, а також фрагменти хромосом еукаріотичних клітин. Сучасні векторні системи дозволяють створювати рекомбінантні молекули, що здатні нести у своєму складі послідовності довжиною до кількох сотень тисяч нуклеотидів (так звані [[штучна хромосома дріжджів|штучні хромосоми]]).
 
Стандартна процедура клонування включає в себе 4 базових кроки:<ref>{{cite book|author = J. Reece | title = Analysis of Genes and Genomes| location= Manchester| publisher = Wiley-Blackwell,| year = 2004| page=183}}</ref>
 
1) Виділення послідовностей чужорідної ДНК;