Відкрити головне меню

Зміни

м
робот додав: id:ELISA; косметичні зміни
Існує цілий ряд підходів, що дозволяють визначити, чи відбулося зв’язування [[антитіло|антитіла]] з [[антиген]]ом-мішенню. Один з них - це ферментний іммуносорбентний аналіз (ELISA), що часто використовується для діагностики різноманітних антигенів.
Процедура аналізу включає наступні етапи:
[[ImageФайл:ELISA-sandwich.svg|thumb|400px|Схема проведення аналізу]]
# Підготовка підкладки для фіксації досліджуванного зразка;
# Зразок, у якому хочуть виявити специфічну молекулу або мікроорганізм, фіксують на твердій підкладці, наприклад на пластиковій мікротитрувальній плашці, що зазвичай має 96 лунок;
# До фіксованого зразка додають антитіло, специфічне до маркерної молекули (перше антитіло), потім промивають лунку, щоб видалити молекули першого антитіла, які не зв'язалися;
# Додають друге антитіло, що специфічно зв'язується з першим антитілом і не взаємодіє з маркерною молекулою. До цього антитіла приєднаний [[фермент]] (наприклад, лужна [[фосфатаза]], [[пероксидаза]] або [[уреаза]]), що може каталізувати перетворення незабарвленого [[субстрат]]у в забарвлений продукт. Промивають лунку, щоб видалити молекули, які не зв'язалися;
# Додають незабарвлений субстрат, що впізнається та утилізується ферментом;
# Проводять якісне або кількісне визначення пофарбованого продукту.
Основний принцип ELISA - специфічне зв'язування першого антитіла з мішенню. Якщо молекула-мішень являє собою білок, то його очищений препарат звичайно використають для одержання антитіл, за допомогою яких потім і виявляють дану мішень. Раніше використовувались перші антитіла, що були за своєю природою [[поліклональні антитіла|поліклональними]]. Розробка і застосування [[моноклональні антитіла|моноклональних антитіл]] дало змогу зачно покращити специфічність імуноферментного аналізу.
== Застосування ==
 
== Джерела ==
* Б. Глік, Дж. Пастернак, Молекулярна біотехнологія, Москва, Мир, 2002.
{{med-stub}}
 
{{Ізольована стаття}}
 
[[Категорія:Медична термінологія]]
[[Категорія:Молекулярна діагностика]]
[[Категорія:Імунологія]]
 
{{med-stub}}
 
{{Ізольована стаття}}
 
[[ca:ELISA]]
[[fr:Enzyme-linked immunosorbent assay]]
[[he:ELISA]]
[[id:ELISA]]
[[it:ELISA]]
[[ja:ELISA]]
217 206

редагувань