Імуноферментний аналіз (ELISA): відмінності між версіями
| [неперевірена версія] | [неперевірена версія] |
Вилучено вміст Додано вміст
JAnDbot (обговорення | внесок) м робот добавил: cs:ELISA изменил: sv:Enzymkopplad immunadsorberande analys |
Leonst (обговорення | внесок) Немає опису редагування |
||
Рядок 1:
'''Імуноферментний аналіз (ІФА)''' або більш точно '''ферментний імуносорбентний аналіз''' ({{lang-en|enzyme-linked immuno sorbent assay, ELISA}}) - імунологічний метод для визначення наявності певних [[антиген]]ів, що заснований на ідентифікації комплексів [[антиген]]-[[антитіло]]. Широко використовується в лабораторній діагностиці.
Існує цілий ряд підходів, що дозволяють визначити, чи відбулося зв’язування [[антитіло|антитіла]] з [[антиген]]ом-мішенню. Один з них - це ферментний іммуносорбентний аналіз (ELISA), що часто використовується для діагностики різноманітних антигенів.
Процедура включає наступні етапи:
[[Image:ELISA-sandwich.svg|thumb|400px|Схема проведення аналізу]]
#Підготовка підкладки для фіксації досліджуванного зразка;
#Зразок, у якому хочуть виявити специфічну молекулу або мікроорганізм, фіксують на твердій підкладці, наприклад на пластиковій мікротитрувальній плашці, що зазвичай має 96 лунок;
#До фіксованого зразка додають антитіло, специфічне до маркерної молекули (перше антитіло), потім промивають лунку, щоб видалити молекули першого антитіла, які не зв'язалися;
#Додають друге антитіло, що специфічно зв'язується з першим антитілом і не взаємодіє з маркерною молекулою. До цього антитіла приєднаний [[фермент]] (наприклад, лужна [[фосфатаза]], [[пероксидаза]] або [[уреаза]]), що може каталізувати перетворення незабарвленого [[субстрат]]у в забарвлений продукт. Промивають лунку, щоб видалити молекули, які не зв'язалися;
#Додають незабарвлений субстрат, що впізнається та утилізується ферментом;
#Проводять якісне або кількісне визначення пофарбованого продукту.
Основний принцип ELISA - специфічне зв'язування першого антитіла з мішенню. Якщо молекула-мішень являє собою білок, то його очищений препарат звичайно використають для одержання антитіл, за допомогою яких потім і виявляють дану мішень. Раніше використовувались перші антитіла, що були за своєю природою [[поліклональні антитіла|поліклональними]]. Розробка і застосування [[моноклональні антитіла|моноклональних антитіл]] дало змогу зачно покращити специфічність імуноферментного аналізу.
== Застосування ==
Ферментний імуносорбентний аналіз широко застосовується для діагностики різноманітних [[інфекційні захворювання|інфекційних захворювань]], [[рак]]ових процесів (восновному завдяки специфічним [[білки|білкам]] і [[пептид]]ам), визначення різноманітних низькомолекулярних сполук, такі як [[токсини]], лікарські засоби і т. п.
== Джерела ==
*Б. Глік, Дж. Пастернак, Молекулярна біотехнологія, Москва, Мир, 2002.
[[Категорія:Медична термінологія]]
[[Категорія:Молекулярна діагностика]]
[[Категорія:Імунологія]]
[[ca:ELISA]]
| |||