Генетичний фінґерпринтинг: відмінності між версіями

нема опису редагування
мНемає опису редагування
Немає опису редагування
[[Файл:D1S80Demo.png|thumb|Рис.1]]
'''Генна дактилоскопія''', '''Генетичнийгенетичний фінгенпринтінг''', '''фінгерпринтінг''' (від {{lang-en|fingerprinting}} — «зняття відбитків пальців») або '''метод генетичних відбитків пальців''' — метод розрізнення індивідуумів за допомогою використання зразків їх [[ДНК]]. Перший варіант методу був розроблений [[Алек Джеффріс|Алеком Джеффрісом]] в [[Лестерський університет|Лестерському університеті]] в [[1985]] році. Більшість [[нуклеотидна послідовність|нуклеотидних послідовностей]] ДНК кожних двох людей зазвичай ідентична. В методі фінгерпринтінгу використовуються, проте, надзвичайно варіабельні послідовності, які дозволяють розрізнити різних людей. ДвіДжеффріс родинновизнав, незв'язаніщо людиниу наврядкожної чиособи матимутьє такуунікальна жмодель саму картину ДНК в даному [[Локусмінісателітів (генетика)|локусі]].проте Генетичнийіснують фінгерпринтінгвипадки неїх є єдиним методом, а набором засобів розрізнення послідовностей цих варіабельних послідовностей. Наприклад,ідентичності в методіоднояйцевих STR-профайлінгу використовуються повторювані ділянки, [[мінісателіти]], які [[ампліфікація (біологіяблизнюків)|ампліфікуються]] за допомогою [[полімеразна ланцюгова реакція|полімеразної ланцюгової реакції]] (ПЛР) для виявлення числа повторень в кількох локусах. ТакимЗа чиномчасів можнаДжеффріса встановитиДНК ідентичністьрозрізали людиниферментами, якащоб зазвичайгенерувати навряд чифрагменти. опинитьсяКрім помилковоютого, окрімвикористовували випадківрадіоактивність ідентичнихдля [[Близнюки|близнят]],їхнього якімаркування. мають ідентичні [[геном]]и.
 
== Застосування ==
У [[судово-медична експертиза|судово-медичній експертизі]] метод фінгерпринтінгу використовується для ідентифікації підозрюваних по зразкамзразках крові, волосся, слини або сперми. Це вже привело до кількох випадків реабілітації підозрюваних, навіть після оголошення вироку. Метод також використовується для встановлення ідентичності людських залишків, [[Тест на батьківство|тесті на батьківство]], відповідності [[донорські органи|донорських органів]], дослідження популяції диких тварин і встановлення походження продуктів харчування. Метод може використовуватися і для перевірки гіпотез про походження етнічних груп.
 
Метод фінгерпринтінгу вимагає певного законодавства, щоб мати юридичну силу. Зазвичай тест є добровільним, але може бути обов'язковим за допомогою [[судовий ордер|судового ордеру]] або запиту. Декілька юрисдикцій почали збирати бази даних, що містять інформацію ДНК злочинців. Найбільші у світі [[база даних ДНК|бази даних ДНК]] підтримують [[США]] ([[NDNAD]]) та [[Велика Британія]], кожна містить понад 4,5 мільйони записів станом на [[2007]] рік. Розмір баз даних та право держави на збір даних, проте, викликають занепокоєння деяких правозахисних організацій в обох країнах<ref>{{Cite web |url=http://www.wikicrimeline.co.uk/index.php?title=Identification_by_body_samples_and_impressions#Section_82:_Restrictions_on_use_and_destruction_of_fingerprints_and_samples |title=Restrictions on use and destruction of fingerprints and samples |accessdate=18 листопад 2007 |archiveurl=https://web.archive.org/web/20070223205051/http://www.wikicrimeline.co.uk/index.php?title=Identification_by_body_samples_and_impressions#Section_82:_Restrictions_on_use_and_destruction_of_fingerprints_and_samples |archivedate=23 лютий 2007 |deadurl=yes }}</ref>.
[[Файл:Процедура фінгерпринтингу.png|міні|460x460пкс|Рис.2 Метод створення унікального відбитка]]
 
== Метод створення унікального відбитка (Рис. 2) ==
 
# Отримання зразків клітин (шкіра та її виділення, волосся, клітини крові тощо);
# Очищення ДНК за допомогою методів SLP або MLP (про них йтиметься потім);
# Розрізання ДНК рестрикційним ферментом;
# Частинки розділяються за довжиною або молекулярною масою гелевим електрофорезом;
# Фрагменти візуалізуються. Ті, що відокремлені, переносяться з гелю на нейлоновий папір;
# Додається радіоактивно мічений ДНК-зонд, який пов'язує ці частинки з комплементарними послідовностями;
# Промокання покривають плівкою, чутливою до радіації (для отримання авторадіографа), яка показує розташування тих фрагментів ДНК, що реагували з радіоактивним зондом;
# Кінцевим продуктом відбитка ДНК є авторадіограф, який містить щонайменше п’ять основних смуг.
 
Маркери - це стандартизовані фрагменти ДНК відомого розміру, які були радіоактивно мічені. Вони допомагають визначити розмір різних фрагментів.
 
На дослідних смугах є зразки жертви, підсудного та місця злочину. На цьому прикладі кров з одягу підозрюваного порівнювали з його власною та кров’ю жертви. ДНК з одягу підозрюваного насправді відповідає ДНК потерпілого.
 
== Очищення ДНК ==
Очищення ДНК — один із найважливіших пунктів створення унікального відбитка. Його роблять двома найпопулярнішими та найефективнішими методами: мультилокусним та однолокусним зондуванням.
[[Файл:Ferhnloi76mkyhgt4563.png|міні|Рис.3 ДНК потерпілого, підозрюваного та докази були відокремлені за допомогою SLP. Продукти SLP із доказів, потерпілого, підозрюваного та контролю застосовувались як чотири окремі плями на капроновій мембрані. Її обробляли чотирма різними зондами, так що кожен зонд контактував з кожним із різних продуктів SLP. Зауважте: модель підозрюваного та докази однакові. Отже, підозрюваний був присутній на місці злочину.]]
'''Метод мультилокусного зондування (MLP)'''. Мультилокусні зонди зв'язуються з кількома ділянками в геномі і відповідно генерують кілька смуг у кожної людини. Оскільки невідомо, яка саме група походить з якого конкретного локусу, інтерпретація є складною. Крім того, статистичний аналіз недоцільний, дані не можуть бути надійно стандартизовані для посилання. На практиці відбитки пальців, згенеровані MLP, повинні безпосередньо порівнюватися з іншими, що працюють на тому ж гелі.
 
'''Метод однолокусного зондування (SLP)'''. У SLP кожний зонд специфічний для окремого локусу в геномі. Оскільки люди є диплоїдними, кожен зонд SLP зазвичай породжує дві смуги, за умови, що обраний локус демонструє істотне алельне змінення. Для повної ідентифікації за допомогою SLP необхідно провести кілька реакцій, кожна з яких використовує інший зонд SLP.
 
''Використання SLP:''
 
* підготовка ДНК до дактилоскопічного дослідження;
* генерування сегментів ДНК для прямого порівняння шляхом секвенування ДНК або гібридизації;
* ампліфікація невеликих ділянок ДНК з високою мінливістю від людини до людини. Якщо послідовності двох зразків збігаються в декількох дуже змінних регіонах, вони, ймовірно, від однієї людини.
 
''Гібридизація (Рис.3):''
 
* плями зразків ДНК зв'язуються з мембраною і тестуються на зв'язування ДНК-зонда, який позначений флуоресцентним барвником (радіоактивні зонди використовувались на ранніх роботах);
* такі плями зонд або зв'язує, або ні, тому будь-яка пляма є або позитивною, або негативною.
 
Історично MLP використовувався до SLP. Однак у SLP-аналізах використовується менша кількість матеріалу, та їх легше інтерпретувати та порівнювати. Точний статистичний аналіз можливий саме  завдяки даним SLP. Отже, метод MLP значною мірою був витіснений методом SLP.
 
== Становище в Україні ==
24

редагування